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机构地区:[1]北京林业大学园林学院,国家花卉工程中心,北京100083
出 处:《生物技术》2010年第4期1-3,共3页Biotechnology
基 金:国家自然科学基金项目("牡丹切花糖信号与乙烯信号转导互作机制研究";30972030);教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-05-0138)资助
摘 要:目的:利用巢式PCR技术克隆牡丹泛素延伸蛋白基因,为泛素蛋白降解系统研究奠定基础,也为牡丹基因表达水平研究提供内参基因。方法:从牡丹(Paeonia suffruticosa)叶片、花瓣、花萼中提取总RNA,反转录得到cDNA,根据已报道的泛素延伸蛋白基因设计巢式引物进行PCR扩增。结果:得到一条389bp的牡丹泛素延伸蛋白基因片段,该片段编码129个氨基酸残基。结论:通过Blastn比对分析表明:牡丹泛素延伸蛋白基因与番茄、水稻、拟南芥等植物的泛素延伸蛋白基因一致性达到100%,编码的氨基酸序列同源性达94%以上。确认该片段即牡丹泛素延伸蛋白基因。Objective:Cloning of ubiquitin extension gene from Paeonia suffruticosa,was the foundation of further research and gene expression study.Method:Total RNA was extracted from leaves,petals and sepals.Then reverse transcripted by M-MLV.Result:A 389bp fragment was obtained by Nest PCR,which encoded 129 amino acid residues.Conclusion:The fragment showed 100% identities with Arabidopsis thaliana,Solanum tuberosum,Oryza sativa,et al,while similarities of the deduced amino acid were more than 94% .
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