应用实时荧光定量PCR测定牛体细胞端粒长度  

Bovine Somatic Cell Telomere Length Measurement by Quantitative PCR

作　　者：吕昆[1] 林丹[1] 许淼[1] 朱怡文[1] 黄英[1] 

机构地区：[1]上海交通大学医学院,上海市儿童医院上海医学遗传研究所,卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室,上海市生殖与胚胎工程重点实验室,上海200040

出　　处：《中国畜牧兽医》2010年第9期154-158,共5页China Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：国家“863”重点项目:人药用蛋白动物乳腺生物反应器(2007AA100502);“转基因生物新品种培育”国家科技重大专项:应用转基因体细胞克隆技术培育高乳蛋白(人转铁蛋白)的良种奶牛(2009ZX08007-003B);上海市科委产学研项目:应用体细胞克隆技术扩繁良种奶牛种群(08DZ2200600)

摘　　要：本研究为了验证应用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative PCR,Q-PCR)测定牛基因组端粒长度的可行性,选取18个不同来源牛耳成纤维细胞抽提基因组DNA为样本,对Q-PCR和经典的Southern印迹法进行了相关性分析。结果显示,Q-PCR测定端粒长度相对T/S为1.16±0.24,Southern印迹法测量端粒平均TRF值为16.99 kb±0.85 kb,两种方法获得的结果相关性分析R2=0.5612(P<0.01),因此实时荧光定量PCR是一种测定牛基因组端粒长度的可靠的方法。In order to test the possibility of quantitative PCR（Q-PCR） in the measurement of bovine telomere length,we chose 18 different DNA samples of bovine ear fibroblast,and then analyzed the relativity of quantitative PCR and Southern blotting methods.The results showed that the relative T/S ratio of Q-PCR was 1.16±0.24,the mean TRF of Southern blotting was 16.99 kb±0.85 kb.The analysis of the relativity of two methods showed that R2= 0.5612（P〈0.01）,so we got the conclusion that Q-PCR was a reliable method in the measurement of bovine telomere length.

关 键 词：荧光定量聚合酶链式反应 印迹法 牛体细胞 端粒长度 

分 类 号：S814.8[农业科学—畜牧学]