急性乙型肝炎患者HBV特异性CD8^+ T细胞受体α和β链亚家族特点  

作　　者：叶海燕[1,2] 王琳[1] 丁宁[1] 范振平[1] 刘妍[1] 钟彦伟[1] 刘永明[2] 徐东平[1] 

机构地区：[1]解放军第302医院全军传染病研究所,北京100039 [2]桂林医学院生物技术学院,广西桂林541004

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2010年第9期862-864,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30771898);军队"十一五"医药卫生科研杰出人才项目(06J024)

摘　　要：目的:分析急性乙型肝炎患者HBV特异性CD8+ T细胞受体α和β链亚家族特点。方法:从1例HLA*0201的急性乙型肝炎患者的外周血分离外周血单个核细胞(PBMC),用乙肝抗原HBsAg表位S335-343多肽和细胞因子刺激PBMC以诱导CD8+ T增殖,用流式细胞仪分选出特异性CTL到96孔培养板,培养10～14 d后,提取细胞RNA,PolyA介导反转录,巢式PCR扩增TCR Vα和TCR Vβ,并用非特异性CD8+ T细胞作为对照。对扩增产物分别进行直接测序和克隆测序分析。结果:从HBV急性肝炎患者分离的HBsAg335-343表位特异性CD8+ T细胞扩增出15个Vα亚家族和10个Vβ亚家族,其中用少量CTL仅检出Vα2、Vα9和TCR Vβ3、Vβ4、Vβ9,提示这几种亚家族可能为该特异性CTL TCR的优势取用亚家族,除Vα2呈现3种序列和Vβ9呈现2种序列外,其他亚家族内序列单一;而从患者非特异性CD8+ T对照细胞中可扩增到所有的32个TCRVα和25个Vβ亚家族,且同一亚家族序列呈现高度多样性。结论:急性乙型肝炎患者HBV特异性CD8+ T细胞受体存在优势利用的特点,可能是由于针对同一抗原的特异性CD8+ T细胞克隆性增殖所致,其机制有待进一步分析。

关 键 词：CD8+ T细胞 T细胞受体(TCR) RT-PCR 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]