细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察  

Dynamic observation on cytokines of splenocytes in mice immunized with recombinant Bb-Eg95-EgA31 vaccine of Echinococcus granulosus

作　　者：周必英[2] 陈雅棠[1] 李文桂[1] 杨梅[1] 

机构地区：[1]重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,400016 [2]贵州省遵义医学院寄生虫学教研室

出　　处：《中国地方病学杂志》2010年第5期508-514,共7页Chinese Jouranl of Endemiology

基　　金：国家自然科学基金（30801052、30671835、30500423、30200239）

摘　　要：目的 动态观察细粒棘球绦虫（Eg）重组双歧杆菌（Bb）-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化.方法 将5×108克隆形成单位（CFU）和5×105 CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔黏膜接种免疫Balb/c小鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原（EgAg）、刀豆蛋白A（ConA）或脂多糖（LPS）刺激培养,同时设有双歧杆菌液体培养基（MRS）对照.收集脾细胞培养上清液,ELISA法检测γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-12、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和IL-10水平.结果 口服灌胃组的IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2～8、2～8、4、6～10周升高,分别在免疫后4、2、4、6周达最高水平,其EgAg刺激组IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别为（700.0±115.5）、（45.0±5.8）、（350.0±57.7）、（112.5±14.4）ng/L,与0周[（35.0±5.8）、（12.5±2.9）、（190.0±11.6）、（25.0±5.8）ng/L]及MRS对照组[（37.5±5.0）、（13.8±2.5）、（195.0±5.8）、（27.5±2.9）ng/L]比较,差异有统计学意义（P＜0.05或＜0.01）;鼻腔接种组的IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2～8、2～8、2～6、6～16周升高,分别在免疫后2、2、4、8周达最高水平,其EgAg刺激组IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别为（700.0±115.5）、（55.0±5.8）、（275.0±28.9）、（140.0±11.6）ng/L,与0周[（35.0±5.8）、（12.5±2.9）、（190.0±11.6）、（25.0±5.8）ng/L]及MRS对照组[（37.5±5.0）、（13.8±2.5）、（195.0±5.8）、（27.5±2.9）ng/L]比较,差异有统计学意义（P＜0.05或＜0.01）.EgAg、ConA、LPS刺激组的细胞因子水平高于相应的脾细胞悬液组（P＜0.05或＜0.01）,ConA或LPS刺激组的细胞因子水平高于相应的EgAg刺激组（P＜0.05或＜0.01）.结论 细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗在免疫早期（2～6周）可诱导小鼠脾细胞产生Th1和Th2混合型�Objective To dynamically observe the changes of cytokines of splenocytes in mice immunized with recombinant bifidobacteria bifidum （Bb）- Eg95-EgA31 vaccine of Echinococcus grauulosus （Eg）. Methods Balb/c mice were vaccinated by 5× 108 colony forming unit（CFU） orally and 5 × 105 CFU intranasally, respectively.Mice were killed on week 0,2,4,6,8,10, 12,14,16, 18 and 20 after immunization, respectively, and spleens were separated for cell culture with the stimulation of EgAg, concanavalin A （ConA） or lipopolysaccharide （LPS）. The splenocyte supernatants were collected to determine the levels of interferonγ（IFN-γ）, interleukin（IL）-12, tumor necrosis factor α（TNF-o） and IL-l0 using enzyme linked immunosorbent assay（ELISA） with MRS as control. Results In the oral immunization group, the levels of IFN-γ, IL-12, TNF-α and IL-10 showed a significant increase from week 2 to week 8, week 2 to week 8, week 4 and week 6 to week 10 after vaccination, respectively, and reached the highest level on week 4, week 2, week 4 and week 6 after vaccination, respectively;in EgAg stimulation group, the levels of IFN-γ, IL-12, TNF-α and IL-10 were （700.0 ± 115.5）, （45.0 ± 5.8）, （350.0 ± 57.7）, （112.5 ± 14.4）ng/L, respectively, compared with week 0[（35.0 ± 5.8）, （12.5 ± 2.9）, （190.0 ± 11.6）, （25.0 ± 5.8）ng/L, P 〈0.05 or 〈 0.01] and MRS control group[（37.5 ± 5.0）,（13.8 ± 2.5）, （195.0 ± 5.8）, （27.5 ± 2.9）ng/L, P〈 0.05or 〈 0.01]. In the intranasal immunization group, the levels of IFN-γ, IL-12, TNF-α and IL-10 showed an obvious increase from week 2 to week 8, week 2 to week 8, week 2 to week 6 and week 6 to week 16 after vaccination,respectively, and reached the highest level on week 2, week 2, week 4 and week 8 after vaccination, respectively;in EgAg stimulation group, the levels of IFN-γ, IL-12, TNF-α and IL-10 were （700.0 ± 115.5）, （55.0 ± 5.8）,（275.0 ± 28.9）, （140.0 ± 11.6）ng/L, compared with week 0[（35

关 键 词：细粒棘球绦虫 疫苗 合成 细胞因子类 

分 类 号：R686[医药卫生—骨科学]