多重RT-PCR方法检测新型甲型H_1N_1流感病毒的研究  

作　　者：罗吉新 李海妙[2] 林志达[2] 王振全[3] 苏惠龙[2] 罗宝正[2] 

机构地区：[1]三统万福(青岛)食品有限公司,山东青岛266700 [2]广东省珠海出入境检验检疫局/国家外来病检测重点实验室,广东珠海519015 [3]吉林大学畜牧兽医学院,长春130062

出　　处：《湖北畜牧兽医》2010年第10期8-11,共4页Hubei Journal of Animal and Veterinary Sciences

摘　　要：为了建立快速检测新型甲型H1N1流感病毒的多重PCR技术,根据GenBank中公布甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)的HA和NA基因序列,设计并合成两套特异性引物。使用TaKaRa公司的一步法RT-PCR试剂盒和自行设计合成的引物建立多重RT-PCR反应,按照预期的PCR产物序列合成的DNA作为阳性对照。结果表明,该方法具有良好的特异性,可以将甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)与传统甲型H1N1、H3N2、H5N1、H6N2和H9N2亚型流感病毒区分。该方法同时具有较高的灵敏度,最低可以检测到100个拷贝的阳性克隆质粒。在对183份发热病人临床咽拭子样品检测中发现了10份阳性样品,对350份猪鼻腔拭子样品检测全部呈阴性,结果与中国检验检疫科学研究院试剂盒检测结果一致,说明了该多重RT-PCR方法在临床检测新型甲型H1N1流感病毒方面具有广阔的应用前景。

关 键 词：多重RT-PCR 甲型流感病毒 H1N1亚型 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]