细胞代数与5-氮胞苷浓度对体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞定向分化的影响  

作　　者：王宁[1] 李新华[1] 邢万红[1] 陈平[1] 

机构地区：[1]山西医科大学第二医院

出　　处：《中西医结合心脑血管病杂志》2010年第10期1220-1222,共3页Chinese Journal of Integrative Medicine on Cardio-Cerebrovascular Disease

基　　金：山西省科技攻关项目(No.20080311061-2);山西省太原市科技发展项目(No.0904052)

摘　　要：目的探讨不同细胞代数与不同5-氮胞苷(5-Aza)浓度对体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞定向分化增殖能力的影响。方法采用Percoll密度梯度离心法分离大鼠骨髓单个核细胞。选择第2代、第6代、第10代细胞,每代分为四组(三组为诱导组,一组为对照组),三个诱导组分别以5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L5-氮胞苷孵育24h后,与对照组以完全培养液连续培养5d。通过MTT法测取各代细胞诱导组与对照组第1天、第3天、第5天的OD值,计算三代细胞经不同浓度5-氮胞苷诱导后及对照组的增殖率。采用免疫细胞化学法检测各代MSCs经不同浓度5-氮胞苷诱导培养4周后心肌特异蛋白cTnT、α-Actin的表达。结果正常对照组第2代与第6代细胞增殖率无统计学意义(P>0.05),与第10代细胞均有统计学意义(P<0.05)。相同浓度药物诱导的三代细胞,第2代细胞与第6代、第10代细胞增殖率有统计学意义(P<0.05),第6代、第10代细胞增殖率无统计学意义(P>0.05)。不同5-氮胞苷浓度诱导的同代细胞间增殖率无统计学意义(P>0.05)。经三种浓度5-氮胞苷诱导的2代、6代、10代MSCs均表达心肌特异蛋白cTnT、α-Actin,对照组表达为阴性。结论随着细胞代数的增加,药物浓度对细胞的增殖能力影响越来越小。经5-氮胞苷诱导的MSCs表达心肌特异蛋白cTnT、α-Actin,未经诱导的MSCs不表达心肌特异蛋白。

关 键 词：骨髓间充质干细胞 心肌细胞 5-氮胞苷 诱导分化 增殖能力 

分 类 号：R329[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]