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作 者:李佳[1] 张宝路[1] 韩红兵[1] 曹之辰[1] 连正兴[1] 李宁[1]
机构地区:[1]中国农业大学动物科技学院,农业生物技术国家重点实验室,北京100193
出 处:《中国科学:生命科学》2010年第10期938-951,共14页Scientia Sinica(Vitae)
基 金:国家重点基础研究发展计划(批准号:2006CB102100);国家自然科学基金(批准号:30471234)资助项目
摘 要:细胞能量代谢与细胞生命活动紧密相关,但目前对于鸡胎干细胞能量代谢特的研究较少.本研究利用前期建的chES细胞模型,通过电子显微发现未分化的chES细胞胞质内储存大量糖原颗和卵黄颗.逆转录-聚合酶链反应对能量代谢途中的要限速酶的基因表达分析显,未分化的chES细胞不表达丙酮酸羧化酶和磷酸烯醇丙酮酸羧激酶,与鸡胎成纤维细胞相比低表达葡萄糖转运蛋白1和磷酸果糖激酶,高表达己糖激酶1和糖原合成酶;分化中的chES细胞与成年母鸡肝脏相比少量表达PCX和PCK2,与CEF细胞相比高表达GLUT1,HK1,PFK,而GYS的表达没有显性差异.过酸希夫氏染色显,细胞养过程中未分化chES细胞中储存的糖原颗未见减少,而分化中的chES细胞的糖原颗逐渐减少.此外,通过赫斯特荧光染料33342和化丙啶双染色发现,大量未分化的chES细胞在体外养过程中死亡,而添加外源性6-磷酸葡萄糖显减少细胞死亡.上述果说明,未分化chES细胞要以糖原合成为,无糖异生代谢,而分化中的chES细胞以糖酵代谢为.未分化的chES细胞以大量消耗代谢中间产物G6P为代价进行糖原合成,造成细胞内源性G6P相对不足引起细胞死亡.因此,细胞内糖原的含量反映了chES细胞的分化程度.chES细胞在体外养时可通过添加G6P来提高生存率.
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