大肠杆菌等受体tRNA^(Leu)的T7 RNA聚合酶转录  

作　　者：李勇[1] 陈剑峰[1] 王恩多[1] 王应睐 

机构地区：[1]中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室,上海200031

出　　处：《中国科学（C辑）》1999年第3期253-258,共6页Science in China(Series C)

基　　金：中国科学院"九五"基础性研究重点资助项目!(批准号 :KJ95 2 S1 16 )

摘　　要：用化学方法合成编码 2个大肠杆菌tRNALeu(tRNALeu1和tRNALeu2 )的基因和T7启动子 ,分别克隆到pUC1 9载体上 ,并在纯化的T7RNA聚合酶的体外转录系统中转录出不含修饰核苷酸的tRNALeu.在T7转录体系中 ,亚精胺对转录有负影响 .在最适转录条件下 ,可以得到有活力的RNA转录物的量是模板DNA的 2 5 0倍左右 .在大肠杆菌亮氨酰 tRNA合成酶的催化下 ,2种经体外转录产生的未修饰等受体tRNALeu(tRNALeu1和tRNALeu2 )的亮氨酸接受能力基本相同 ,但只有从体内纯化对应的tRNALeu的四分之一左右 ,表明修饰核苷酸在tRNALeu氨酰化过程中起着较为重要但非关键的作用 .

关 键 词：等受体 T7RNA聚合酶 TRNA 体外转录 大肠杆菌 

分 类 号：Q522[生物学—生物化学] Q78