COX-2启动子携带E1A的条件复制性腺病毒(Ad-COX-2-E1A)的构建及鉴定  

作　　者：申强[1] 于音[2] 陈莫[1] 姜涛[2] 邵佳甲[3] 

机构地区：[1]吉林省人民医院,吉林长春130021 [2]吉林大学白求恩第三医院 [3]长春职业技术学院

出　　处：《中国老年学杂志》2010年第24期3736-3739,共4页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的构建COX-2启动子携带E1A的条件复制性腺病毒,为今后利用Ad-COX-2-E1A治疗脑胶质瘤奠定基础。方法①pRsetB-E1A原核表达质粒的构建;②重组E1A蛋白的表达和纯化;③多克隆抗体的制备和抗体检测;④实验细胞COX-2表达水平的检测;⑤重组腺病毒质粒的构建及鉴定。结果①E1蛋白能够被有效表达,抗-E1A多克隆抗体滴度很高;②通过流式细胞仪和RT-PCR两种方法,在脑胶质瘤细胞A-172、LN-18中均检测到了较高水平的COX-2活性;③成功构建了重组腺病毒Ad-COX-2-E1A,并从基因和蛋白水平对其进行了鉴定。结论 Ad-COX-2-E1A被成功构建并具有良好的表达活性,可以作为今后胶质瘤基因治疗的良好载体。

关 键 词：腺病毒 启动子 胶质瘤 

分 类 号：R329.28[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]