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作 者:许娜[1] 储俊[1] 夏海武[1] 赵岩[1] 钱立生[1]
机构地区:[1]安徽科技学院生命科学学院,安徽凤阳233100
出 处:《热带亚热带植物学报》2010年第6期679-684,共6页Journal of Tropical and Subtropical Botany
基 金:安徽省教育厅自然科研一般项目(KJ2010B294;KJ2010B052)资助
摘 要:对根癌农杆菌介导‘新津春四号’黄瓜(Cucumbis sativus L.)遗传转化的影响因素进行了研究。结果表明,黄瓜叶片适宜的潮霉素(Hygromycin,Hyg)筛选浓度为40 mg L-1;500 mg L-1羧苄青霉素(Carbenicillin,Carb)可有效抑菌。预培养2 d有利于转化;共培养2 d有利于提高转化频率并避免农杆菌的过度生长;添加150μmol/L乙酰丁香酮(Acetosyringone,AS),农杆菌浸染液pH5.7、浓度0.8,浸染时间8 min为最佳遗传转化条件。再生植株经gus基因的瞬时表达检测及PCR检测证明hpt基因已成功转化。The genetic transformation system of cucumber 'New Jinchun 4' mediated by Agrobacterium tumefaciens were studied.The cucumber leaves as explants were pre-cultured on MS+1.0 mg L-1 6-BA+0.15 mg L-1 IAA for 2 days.After infected by Agrobacterium(OD600=0.8,pH=5.7) for 8 min supplemented with 150 μmol/L acetosyringone(AS),the explants were co-cultured on MS + 1.0 mg L-1 6-BA + 0.15 mg L-1 IAA + 500 mg L-1 Carb + 40 mg L-1 Hyg for 2 days.The hpt gene were transformed successfully to regenerated plantlets by gus instantaneous expression and PCR test.
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