人CD34真核表达载体构建及稳定转染细胞系的建立  

Construction of eukaryotic expression vector of human CD34 and establishment of stably transfected cell line

作　　者：石琳 屈浩 刘红芹 高海霞 朱卫彬 

机构地区：[1]协和干细胞基因工程有限公司,天津300384

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2011年第1期36-39,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：天津市科技创新专项资金项目(08FDZDSH03000)

摘　　要：目的:构建人CD34真核表达载体,转染到3T3细胞获得稳定表达CD34的细胞株。方法:在人KG1a细胞中提取细胞总RNA,运用RT-PCR方法扩增CD34基因,定向克隆入真核表达载体pCI-neo,通过电转仪转染3T3细胞,流式细胞仪分选建立稳定转染的3T3细胞系,用RT-PCR、FACS检测目的蛋白的表达。结果:构建了重组载体pCI-neo/CD34,建立了稳定表达CD34的3T3细胞系。结论:重组载体pCI-neo/CD34构建成功和稳定转染3T3-CD34细胞系的建立为制备抗人CD34单克隆抗体(mAb)做了准备,为进一步研究CD34分子的功能奠定了基础。AIM： To construct eukaryotic expression vector of human CD34 and transfect it to 3T3 cells so as to establish stably transfected 3T3 cell line. METHODS： The RNA was extracted from KGla. CD34 gene was amplified by RT-PCR. With the doubleenzyme digestion, CD34 gene was cloned into pCIneo eukaryotic expression vector, yielding pCI-CD34.

关 键 词：CD34分子 电转化 分选 稳定细胞系 

分 类 号：R392[医药卫生—免疫学]