多孔微球固定化CHO工程细胞生产rt-PA的研究  

Study on rt-PA Production by Recombinant CHO Cells Immobilized with Porous Microcarrier

作　　者：陈昭烈[1] 吴本传[1] 刘红[1] 林福玉[1] 李世崇[1] 黄培堂[1] 

机构地区：[1]军事医学科学院生物工程研究所,北京100071

出　　处：《生物工程学报》1999年第4期451-454,共4页Chinese Journal of Biotechnology

基　　金：国家高技术研究与发展计划项目

摘　　要：以 Ｃｙｔｏｐｏｒｅ 多孔微球固定产重组组织型纤溶酶原激活剂（ｒｔ Ｐ Ａ） Ｃ Ｈ Ｏ 工程细胞株４ Ｂ３ ，在２ Ｌ 搅拌式生物反应器用无血清培养基 Ｄ Ｆ５ Ｓ 连续灌流培养。４ Ｂ３ 细胞的最大活细胞密度和ｒｔ Ｐ Ａ 生产水平分别达到８８３ ×１０６／ ｍ Ｌ 和１２４７３ Ｉ Ｕ／ ｍ Ｌ。含ｒｔ Ｐ Ａ 的４ Ｂ３ 细胞培养上清经 Ｍ Ｐ Ｇ 吸附层析和 Ｌｙｓｉｎｅｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４ Ｂ 亲和层析两步纯化，ｒｔ Ｐ Ａ 的纯度达到９８ ％ 。Using porous microcarrier Cytopore,immobilized cultivation of a recombinant CHO cell line 4B3 producing tissue type plasminogen activator (rt PA) was performed in a 2L stirred tank bioreactor with the perfusion of a serum free medium DF5S. The highest viable cell density of 4B3 and the highest production level of rt PA were 8.83×10 6cells/mL and 12473 IU/mL,respectively. Purified by MPG absorption chromatography and Lysine Sepharose 4B affinity chromatography, the purified rt PA with a purity exceed 98% was obtained from the culture supernatant.

关 键 词：细胞培养 CHO工程细胞 组织型 纤溶酶原激活剂 

分 类 号：Q813[生物学—生物工程] TQ464.7[化学工程—制药化工]