鼠IL-2基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建  

作　　者：黄大林[1] 袁桂峰[1] 王鑫[2] 李彬彬[2] 钟江[2] 

机构地区：[1]桂林医学院,广西桂林541004 [2]复旦大学

出　　处：《山东医药》2011年第4期37-39,共3页Shandong Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30770079)

摘　　要：目的构建携带鼠IL-2基因的重组杆状病毒表达载体。方法将目的基因鼠IL-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中,构建重组质粒pFB-CMV-IL-2并予酶切和PCR鉴定;将pFB-CMV-IL-2转化到含杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态菌中,筛选阳性克隆,获得重组杆状病毒载体Bacmid-pFB-CMV-IL-2,抽提质粒;用脂质体转染法将Bacmid-pFB-CMV-IL-2转染Sf9昆虫细胞包装病毒;收获完整重组杆状病毒,反复感染Sf9细胞扩增病毒,提取杆状病毒基因组,用PCR验证重组杆状病毒的正确性。结果成功构建鼠IL-2基因杆状病毒表达载体。结论本试验为进一步在哺乳细胞中表达鼠IL-2基因、开发研究IL-2奠定了基础,同时亦为其他蛋白质的真核细胞表达提供了方法参考。

关 键 词：白细胞介素2 杆状病毒科 载体 质粒 小鼠 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学] R373.9[医药卫生—病原生物学]