家蚕G蛋白γ亚基BmGγ30A的克隆及其原核表达  

作　　者：章玉萍[1] 范涛[1] 蒋剑豪[2] 代君君[1] 王储炎[1] 吴传华[1] 田善富[1] 肖林珍[1] 樊美珍[3] 

机构地区：[1]安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥230061 [2]中国科学院上海生命科学院植物生理生态研究所,上海200032 [3]安徽农业大学微生物防治重点实验室,安徽合肥230036

出　　处：《中国蚕业》2011年第1期8-14,共7页China Sericulture

基　　金：安徽省农业科学院院长青年创新基金项目(编号201005A01);现代农业产业技术体系建设专项(蚕桑);安徽省蚕桑产业技术体系

摘　　要：异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导。为了研究G蛋白在家蚕中的生理功能及其作用机理,运用生物信息学方法预测到家蚕Gγ的一段序列,通过设计特异性引物、PCR和RACE技术,克隆得到家蚕Gγ30A的序列。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+),并导入E.coli BI21宿主菌中进行诱导表达。家蚕Gγ30A重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子量约38 KDa处,出现特异性蛋白条带,表达方式分析发现融合蛋白在上清和包涵体中均有表达;试验结果说明我们已成功克隆到家蚕Gγ30A基因(GeneBank登录号:HQ699664),并在E.coli BL21中高效表达。

关 键 词：家蚕 G蛋白γ亚基 克隆 BmGγ30A基因 原核表达 

分 类 号：S881.24[农业科学—特种经济动物饲养]