利用正交设计法优化观赏贝母ISSR-PCR反应体系  

作　　者：吴晓清[1,2] 周玉珍[1] 娄晓鸣[1] 张文婧[1] 成海钟[1] 

机构地区：[1]苏州农业职业技术学院,江苏苏州215008 [2]南京林业大学,江苏南京210037

出　　处：《江苏农业科学》2011年第1期33-36,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：江苏省农业三项工程项目[编号:SX(2007)907];江苏省苏州市自然科学基金(编号:YJG0906)

摘　　要：利用正交试验设计的方法,对观赏贝母ISSR-PCR反应体系的5因素(模板DNA、引物、Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用Mnitab数据处理软件分析,建立的最佳反应体系(20μL)为:模板DNA10 ng、引物0.5μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、TaqDNA聚合酶2.0 U。对观赏贝母IS-SR-PCR最佳反应体系进行了梯度退火试验,得到的最佳退火温度为57.9℃。

关 键 词：观赏贝母 ISSR-PCR 反应体系 正交设计 

分 类 号：S682.290.1[农业科学—观赏园艺]