环氧化酶2介导化学性缺氧诱导的人角质形成细胞的炎症损伤作用  

The role of COX-2 in chemical hypoxia induced-inflammatory injury in HaCaT cells

作　　者：杨春涛[1] 杨战利[1] 莫利球[2] 曾凡钦[3] 张美芬[4] 张辉[5] 韩艳芳[3] 胡芬[1] 兰爱平[1] 陈培熹[1] 冯鉴强[1] 

机构地区：[1]中山大学中山医学院生理学教研室,重庆400038 [2]中山大学附属第一医院黄埔院区麻醉科,重庆400038 [3]中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科,广东广州510080 [4]中山大学护理学院,广东广州510080 [5]第三军医大学附属西南医院全军肝胆外科研究所,西南肝胆外科医院,重庆400038

出　　处：《中国药理学通报》2011年第1期69-73,共5页Chinese Pharmacological Bulletin

基　　金：广东省科技计划资助项目(No2010B080701035;2008B080703053)

摘　　要：目的探讨环氧化酶2(COX-2)在化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)诱导永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT)毒性及炎症反应中的作用。方法用CoCl2处理HaCaT细胞,建立化学性缺氧诱导人皮肤角质形成细胞损伤的实验模型。CCK-8比色法检测细胞存活率,ELISA试剂盒检测细胞培养基中白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的水平,Western blot法检测COX-2蛋白的表达。结果 2 000μmol.L-1 CoCl2处理HaCaT细胞0～3 h,可上调COX-2的表达,1 h COX-2表达开始升高,2 h表达达到高峰。用0、500、1 000和2 000μmol.L-1 CoCl2处理HaCaT细胞2 h可剂量依赖性地上调COX-2的表达。2 000μmol.L-1 CoCl2处理HaCaT细胞0～8 h可时间依赖性地降低HaCaT细胞存活率,半数致死时间(LT50)在6 h左右。2 000μmol.L-1 CoCl2处理HaCaT细胞6 h可促进HaCaT细胞释放IL-6和IL-8。选择性COX-2抑制剂(NS-398)可明显对抗2 000μmol.L-1 CoCl2处理引起的细胞毒性及CoCl2诱导的IL-6和IL-8的释放增加。结论 COX-2介导化学性缺氧诱导的HaCaT细胞毒性及炎症损伤作用。Aim To explore the role of cyclooxygenase-2（COX-2）in chemical hypoxia（CoCl2）induced-inflammatory injury in human keratinocytes（HaCaT cells）.Methods HaCaT cells were exposed to CoCl2 to set up a chemical hypoxia-induced cellular model of skin injury.Cell viability was measured with CCK-8 kit.ELISA kits were applied to measure IL-6 and IL-8 releases.Western blot assay was used to detect COX-2 expression.Results Treatment with 2 000 μmol·L-1 CoCl2 for 0 to 3 h up-regulated COX-2 expression,increasing at 1 h and peaking at 2 h in HaCaT cells.Treatment with CoCl2 at the concentrations from 0 to 2 000 μmol·L-1 for 2 h up-regulated COX-2 expression in a dose-dependent manner.Exposure of 2 000 μmol·L-1 CoCl2 for 0 to 8 h led to a time-dependent decrease in cell viability,and the median lethal time（LT50）was about 6 h.Exposure of 2 000 μmol·L-1 CoCl2 for 6 h promoted IL-6 and IL-8 releases from HaCaT cells.NS-398,a selective COX-2 inhibitor,repressed statistically CoCl2-induced cytotoxicity,as well as IL-6 and IL-8 releases.Conclusion COX-2 is involved in chemical hypoxia-induced cytotoxicity and inflammation in HaCaT cells.

关 键 词：化学性缺氧 人皮肤角质形成细胞 炎症反应 环氧化酶-2 白细胞介素-6 白细胞介素-8 

分 类 号：R329.24[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R392.12[医药卫生—基础医学]