表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因重组腺病毒的构建  

Construction of recombinant adenovirus expressing S1 subunit of spike protein of infectious bronchitis virus

作　　者：耿合员[1] 孙元[1] 韩宗玺[1] 邵昱昊[1] 仇华吉[1] 孔宪刚[1] 刘胜旺[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001

出　　处：《中国预防兽医学报》2011年第3期173-176,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：国家十一五科技支撑计划重大资助项目(2006BAD06A03);公益性行业(农业)科研专项经费项目(200803020)

摘　　要：为构建表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)主要免疫原S1蛋白的重组腺病毒,本研究以复制缺陷型人5型腺病毒为载体,以IBVCK/CH/LHLJ/04V株S1基因为外源插入靶基因,通过细菌内同源重组法构建了一株稳定表达IBVS1蛋白(90ku)的重组腺病毒,命名为rAdV-S1。通过PCR鉴定、间接免疫荧光及western blot检测证实S1蛋白在重组腺病毒中获得表达。对构建的重组腺病毒和亲本腺病毒的生长动力学分析表明,该重组病毒的毒价为108.25TCID50/mL,并且两者在生长动力学方面无显著差异。本研究为动物试验和该重组腺病毒免疫特性的研究奠定基础。The S1 subunit of spike protein（90 ku） of infectious bronchitis virus（IBV） is the main immunodominant protein which can induce virus neutralization and haemagglutination-inhibition antibodies.In this study,a recombinant replication-defective human 5 adenovirus（rAdV-S1） that expresses S1 gene from IBV strain CK/CH/LHLJ/04V was constructed with viral titer of 108.25 TCID50/mL in HEK293.Western blot and indirect immunofluorescence assay indicated that the S1 gene was expressed in HEK293 cells infected with rAdV-S1.The growth dynamics indicated that there were no statistically differences between the rAdV-S1 and parental adenovirus.The rAdV-S1 could be sued to further study for the immunogenicity in chickens.

关 键 词：禽传染性支气管炎病毒 S1基因 重组腺病毒 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]