牦牛OB基因的克隆及原核表达  

Cloning of Yak Obese Gene and Its Prokaryotic Expression

作　　者：唐懿挺[1] 姬秋梅 张成福 柴志欣[1] 赵上娟[1] 白雪[1] 信金伟 钟金城[1] 

机构地区：[1]西南民族大学动物遗传育种学国家民委-教育部共建重点实验室,成都610041 [2]西藏自治区农业科学院畜牧兽医研究所,拉萨850000

出　　处：《生物技术通报》2011年第3期116-119,129,共5页Biotechnology Bulletin

基　　金：西南民族大学研究生创新型科研项目

摘　　要：肥胖基因(obese gene,OB gene)表达产物瘦蛋白(leption)具有调节体重、影响动物生长和繁殖率等一系列生物学功能。通过牦牛脂肪组织总RNA的提取,利用RT-PCR克隆出牦牛OB基因的成熟肽cDNA,构建OB基因的原核表达载体OB-pET32a(+),在大肠杆菌表达系统使融合蛋白表达,通过SDS-PAGE检测所表达的融合蛋白。结果表明,克隆的OB基因成熟肽片段为456 bp包含EcoR I和BamH I两个酶切位点,与普通牛、瘤牛该基因的相似性达98.6%。原核表达产物为包涵体形态,大小为31 kD,符合预期结果,为OB基因的高效表达系统的构建奠定基础。The leptin of obese gene expression can regulate body weight,affecting animal growth,reproductive rates and a series of biological functions.We extracted total RNA of fat tissue of yak,cloned mature peptide cDNA of OB gene of yak by RT-PCR,construct prokaryotic expression vector OB-pET32a（＋） of OB gene,take it in E.coli expression system for fusion protein express,then detected fusion protein expression by SDS-PAGE.The results showed OB gene mature peptide fragment have 456 bp,which contain EcoR I and BamH I two restriction sites.The similar between yak and Bos Taurus,Bos indicus is 98.6%.The products of prokaryotic expression is inclusion body shape,31 kD,consistent with expected results,established a basis of OB gene efficient expression system.

关 键 词：牦牛 OB基因 克隆 原核表达 

分 类 号：S823[农业科学—畜牧学]