血管生成抑制素的功能结构域K1-3的融合表达与抗体制备  

作　　者：李福洋[1] 刘新平[1] 苏成芝[1] 张英起[2] 樊代明[2] 杨静华[2] 药立波[3] 

机构地区：[1]第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西西安710033 [2]第四军医大学科研处生物技术中心,陕西西安710033 [3]第四军医大学西京医院消化内科研究所,陕西西安710033

出　　处：《第四军医大学学报》1999年第8期667-670,共4页Journal of the Fourth Military Medical University

基　　金：国家自然科学杰出人才基金!39625023

摘　　要：目的：重组表达angiostatin的功能结构域K1-3，并制备抗体，为其作用机理研究打下基础．方法：设计引物，通过PCR以人纤溶酶原CDNA为模板扩增出K1-3基因片段，克隆至pGEX-4T-l融合表达载体，IPTG诱导，挑出表达克隆，切下基因片段，克隆至pUC19进行序列测定，保留序列完全正确的克隆并进行诱导表达;从SDS-PAGEL切下表达的蛋白条带作为抗原免疫家兔，制备多克隆抗体，并以Westernblotting检测抗血清的结合特异性·结果：DNA电泳结果显示PCR扩增出约780hP的片段，序列测定表明为K1-3;K1-3可以与GST融合表达，产物存在于包含体中;抗血清与K1-3及煮沸变性的天然angiostatin特异地结合．结论：经PCR扩增并克隆到序列正确的K1-3片段，而且能够以融合形式表达，用其免疫家兔获得特异性抗体．

关 键 词：血管生成抑制素 K1-3 融合表达 抗体制备 

分 类 号：Q71[生物学—分子生物学] R392－33[医药卫生—免疫学]