反转录病毒载体介导的EGFP基因在SP2/0小鼠骨髓瘤细胞中的表达  

作　　者：王婧 李昌[2] 李林溪[1] 胡博[1] 丛艳昭[3] 任大勇[1] 王卓越[1] 杜寿文[1] 金宁一[1,2] 

机构地区：[1]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062 [2]军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130062 [3]延边大学农学院,吉林龙井133400

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2011年第3期40-42,共3页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金项目(81001342);"863"国家高技术研究计划项目(2006AA02Z447);军内"十一五"科技攻关项目(06G127);长春市科技局重点项目(2007KZ19)

摘　　要：为了构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的反转录病毒载体,并观察EGFP基因在SP2/0小鼠骨髓瘤细胞中的表达情况。试验将增强型绿色免疫荧光基因片段定向插入反转录病毒载体pFB-neo,获得重组反转录病毒质粒pFB-NE,利用三质粒共转染系统,将含有目的基因的重组反转录病毒质粒pFB-NE以及含有辅助病毒gag-pol和env基因的质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK-293细胞,用产生的重组反转录病毒感染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,并在荧光显微镜下观察EGFP基因的表达。结果表明:重组反转录病毒载体pFB-NE构建正确,重组病毒包装成功,EGFP基因在细胞中能够稳定表达。

关 键 词：反转录病毒载体 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) SP2/0小鼠骨髓瘤细胞 

分 类 号：S813.3[农业科学—畜牧学]