季节性和大流行性H1N1流感血凝素DNA疫苗电穿孔免疫小鼠及攻毒保护实验  

作　　者：谭磊[1,2] 鲁会军[1] 张丹[1,2] 王开艳[1,3] 田明尧[1,2] 刘存霞[1,2] 刘燕瑜[1,2] 胡博[1,2] 金宁一[1] 

机构地区：[1]中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所基因工程重点实验室,长春130062 [2]吉林大学农学部畜牧兽医学院,长春130062 [3]延边大学农学院,延吉133400

出　　处：《中国科学：生命科学》2011年第2期143-149,共7页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：国家高技术研究发展计划(批准号:2006AA10A205);国家科技支撑计划(批准号:2006BAD06A15);国家科技重大专项(批准号:2009ZX10004-103)资助

摘　　要：在流感病毒疫苗中,DNA疫苗有望成为常规疫苗的替代品.研究构建了两个分别编码A/New Caledonia/20/99(H1N1)和A/California/04/2009(H1N1)流感病毒株血凝素抗原的DNA疫苗pV1A5和pVEH1,目的抗原经验证能够正确表达后,利用小鼠模型通过电穿孔方法肌肉注射免疫进行疫苗免疫效力评价.采用血凝抑制实验和酶联免疫吸附实验对免疫小鼠的血清进行血凝素特异性抗体检测,对血凝素特异性的T淋巴细胞经IFN-γ酶联免疫斑点实验进行检测.然后选择小鼠适应株A/NewCaledonia/20/99(H1N1)100个半数致死剂量对候选疫苗免疫的小鼠攻毒并监测生存率和体重变化率,以此评价疫苗保护效力.两疫苗组免疫小鼠T淋巴细胞和体液免疫水平显著高于pVAX1空载体对照组(P<0.05).此外,pV1A5组能够100%保护免疫小鼠抵抗100致死剂量同源病毒小鼠适应株的攻毒,而同种病毒下pVEH1组只有40%的保护率.结果表明,本实验构建的季节性流感DNA疫苗能够对同源病毒攻毒提供完全保护,而大流行流感株DNA疫苗只能部分抵抗季节性流感病毒.

关 键 词：季节性流感 大流行性流感 血凝素 DNA疫苗 电穿孔 H1N1流感病毒 

分 类 号：R392[医药卫生—免疫学]