超滤膜分离纯化珊瑚藻溴过氧化物酶  

Isolation and Purification of Bromoperoxidase from Corallina Officinalis Using Ultrafiltration Membrane

作　　者：程小飞[1] 章表明[2,3] 薛松[2] 肖通虎[1] 

机构地区：[1]宁波大学材料科学与化学工程学院,宁波315211 [2]中国科学院大连化学物理研究所,大连116023 [3]中国科学院研究生院,北京100049

出　　处：《中国生物工程杂志》2011年第3期76-80,共5页China Biotechnology

基　　金：国家"973"计划(2009CB724700);中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-YW-G-073);浙江省自然科学基金(Y407353);浙江省公益技术研究项目(2010C31099)资助项目

摘　　要：利用超滤膜对珊瑚藻中溴过氧化物酶(EC 1.11.1.18,分子质量740kDa)进行分离纯化,对膜的截留分子质量、操作压力、起始蛋白质浓度、搅拌速率、pH、离子强度等条件进行了优化。超滤分离纯化最优条件为:截留分子质量为100kDa的聚偏氟乙烯(PVDF)膜,操作压力为0.02MPa,搅拌速率为600r/min,起始蛋白质浓度为0.1g/L,pH=6.0。对粗酶液先进行热沉淀纯化,再进行超滤纯化,溴过氧化物酶被纯化了21倍,比活为212U/mg,酶活回收率为96%。A novel,simple and highly efficient process for purifying vanadium bromoperoxidase from Corallina officinalis is developed,which is consist of two steps： crude enzyme extraction was heated at 70℃ for 2h,and then was ultrafiltered with PVDF membrane.The ultrafiltration conditions were optimized,and the optimized conditions are： MWCO=100kDa,0.02MPa pressure,600r/min stirring,0.12mg/ml initial protein concentration and pH=6.0.The crude extraction purified with heat treatment and then ultrafitration results a 21-fold purification,with a 96% overall yield and 212U/mg specific activity.

关 键 词：溴过氧化物酶 聚偏氟乙烯(PVDF)膜 超滤 纯化 

分 类 号：Q814.1[生物学—生物工程]