绵羊sTLR4基因的克隆表达及定位  

作　　者：杜金苓[1] 韩红兵[1] 张宝路[1] 连正兴[1] 

机构地区：[1]中国农业大学动物科技学院,北京100193

出　　处：《中国畜牧杂志》2011年第9期28-30,共3页Chinese Journal of Animal Science

基　　金：转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08008-005)

摘　　要：采用RT-PCR方法克隆绵羊TLR4基因的一种新型剪接体形式sTLR4,将sTLR4与EGFP构建融合蛋白表达载体。用EcoR I和Sma I分别双酶切质粒pEGFP-N1和sTLR4基因的PCR产物,采用T4连接酶进行连接,将质粒转化TOP10菌株,挑取阳性克隆采用AgeI和VspI对质粒进行双酶切鉴定。经鉴定的质粒采用电击方法转染胎儿成纤维细胞,在激光共聚焦显微镜下观察sTLR4蛋白在成纤维细胞中的定位情况。结果表明:构建的融合蛋白pEGFP-N1-sTLR4能够在成纤维细胞中正常工作,且sTLR4-EGFP融合蛋白可以在细胞膜上表达。

关 键 词：sTLR4基因 转染 定位 绵羊 

分 类 号：S826.2[农业科学—畜牧学]