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作 者:王艳梅[1] 王陆军[1] 白建荣[1] 赵明[2]
机构地区:[1]山西省农业科学院作物科学研究所,山西太原030032 [2]山西省农业科学院,山西太原030006
出 处:《山西农业科学》2011年第5期389-391,407,共4页Journal of Shanxi Agricultural Sciences
基 金:山西省青年基金项目(2009021032-2);山西省农业科学院科技攻关项目(YGG0849)
摘 要:将现有的抗草甘膦基因(sxglr-11)和带有Ubiquitin启动子的载体进行连接,用壮观霉素(spectino-mycin)抗生素标记,构建携带抗草甘膦基因(sxglr-11)的大肠杆菌。然后利用三亲杂交法,将构建的真核表达载体转入根瘤农杆菌菌株LBA4404。对菌落进行PCR检测以及质粒双酶切产物进行电泳检测,并用构建的工程菌转化玉米试管苗。研究结果表明,表达载体成功转入根瘤农杆菌LBA4404。Glyphosate-resistant gene existing (sxglr-11 )and vector carrying the Uhiquitin promoter were connected and marked with speetinomycin (spectinomycin) antibiotic marker, to construct gene carrying glyphosate ( sxglr- 11 ) in the coliform bacilli. Later, with three-parental mating method, the eukaryotic expression vector transferred into Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404. The products of mycelium PCR, plasmid PCR and plasmid digested by EcoR I and BamH I enzyme were tested by electrophoresis, and the constructed project Agrobacterium was cultured with plantlet of maize. The result showed that eukaryotic expression vector had been transformed into A grob acte rium tumefacie ns LBA4404.
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