全反式维甲酸对HFL-Ⅰ细胞α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、热休克蛋白47表达的影响  

Effect of all-trans-retinoic acid on α-SMA,Collagen-Ⅰ and HSP47 expressions in TGF-β_1-stimulated human lung fibroblasts

作　　者：刘巨源[1] 李佳鑫[1] 海广范[1] 陈永凤[2] 夏武[1] 贾岩龙[1] 

机构地区：[1]新乡医学院药学院药理学教研室,河南新乡453003 [2]新乡医学院第三附属医院呼吸内科,河南新乡453003

出　　处：《中国药理学通报》2011年第5期700-704,共5页Chinese Pharmacological Bulletin

基　　金：河南省教育厅自然科学研究项目(No2009A310007)

摘　　要：目的研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ),热休克蛋白47(HSP47)mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HFL-Ⅰ细胞,MTT法检测不同浓度TGF-β1和ATRA分别作用3 d对HFL-Ⅰ细胞增殖能力的影响。随后分为6组:对照组、5μg·L-1 TGF-β1组、10μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1TGF-β1+0.1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+10μmol·L-1 AT-RA组,RT-PCR和Western blot方法分别检测各实验组细胞中α-SMA,Collagen-Ⅰ,HSP47 mRNA和蛋白的表达。结果①MTT法检测结果显示不同浓度的TGF-β1可刺激HFL-Ⅰ细胞增殖,呈浓度依赖性(P<0.05);不同浓度的ATRA对HFL-Ⅰ细胞增殖能力均有明显抑制作用,并随药物浓度的增加而增强(P<0.05)。②5μg.L-1 TGF-β1诱导后,HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05)。③ATRA以浓度依赖性方式下调经TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mR-NA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 ATRA能够抑制TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞的分化,其作用机制可能与降低Col-lagen-I、HSP47表达有关。Aim To investigate the effects of all-trans-retinoic acid（ATRA） on the expression of α-smooth muscle actin（α-SMA）,Collagen-I and heat shock protein 47（HSP47） in the TGF-β1-stimulated human lung fibroblasts（HFL-Ⅰ）.Methods Firstly,cell proliferation of HFL-Ⅰ was detected by MTT after the cells were treated with different concentrations of TGF-β1 and ATRA respectively for 3 days.HFL-Ⅰ cells in vitro were divided into six experimental groups： the control group;5 μg·L^-1TGF-β1 group;10 μmol·L^-1ATRA group;5 μg·L^-1TGF-β1＋0.1 μmol·L^-1ATRA group;5 μg·L^-1TGF-β1＋1 μmol·L^-1ATRA group;5 μg·L^-1TGF-β1＋10μmol·L^-1ATRA group.Expressions of α-SMA,Collagen-Ⅰ,HSP47 were determined through RT-PCR and Western blot.Results Different concentrations of TGF-β1 and ATRA could respectively promote cell proliferation of HFL-Ⅰ in a concentration-dependent manner.Furthermore,in a concentration-dependent manner,ATRA reduced the mRNA and protein expressions of α-SMA,Collagen-Ⅰ and HSP47 which obviously increased in the TGF-β1-stimulated HFL-Ⅰ cells.Conclusions ATRA can inhibit TGF-β1-stimulated differentiation and proliferation of HFL-Ⅰ cells.The mechanism may be related to the down-regulation of the expression of Collagen-Ⅰ and HSP47.

关 键 词：肌成纤维细胞 转化生长因子-β1 全反式维甲酸 Α-平滑肌肌动蛋白 I型胶原 热休克蛋白47 

分 类 号：R329.24[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R341[医药卫生—基础医学]