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作 者:吕杨[1] 李晓帆[1,2] 徐峰[1,3] 谢院生[1] 陈香美[1]
机构地区:[1]解放军总医院肾病科全军肾脏病研究所暨重点实验室,北京100853 [2]北京大学首钢医院肾病科,北京100144 [3]吉林大学第二医院肾病科,长春130041
出 处:《中国中西医结合肾病杂志》2011年第4期288-290,377,共4页Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Nephrology
基 金:国家自然科学基金青年基金资助项目(No.81000772);"973"国家重点基础研究发展计划项目(No.2007CB507400)
摘 要:目的:利用电转染技术,对大鼠原代系膜细胞进行Septin2质粒和siRNA转染,制备出Septin2过表达和低表达的细胞模型。方法:培养原代系膜细胞,利用电转染方法,转染pEGFP-C1、pRK5和pRK5-Septin2质粒,以及Septin2的siRNA。结果:通过荧光显微镜观察,pEGFP-C1转染的阳性率可达40%,pRK5-Septin2质粒转染组Septin2表达显著升高,而Septin2siRNA转染组Septin2表达显著下降。结论:利用电转染方法转染Septin2质粒和siRNA,成功的建立了Septin2过表达和低表达的细胞模型,为日后研究Septin2的功能建立基础。Objective:Cell model with Septin2 overexpression or inhibition was set up by electroperation of Septin2 plasmid or siRNA.Methods:Rat primary mesangial cells cultured were transfected with pEGFP-C1、pRK5,pRK5-Septin2 and siSeptin2.Results:The results showed that the positive rate of pEGFP-C1 transfection was 40% when detected by fluorescence microscopy;there was significantly higher expression of Septin2 in SEPT2-transfected cells and lower expression of Septin2 in siSEPT2-transfected cells.Conclusion:We set up cell model with Septin2 overexpression and inhibition successfully by electroperation of Septin2 plasmid or siRNA,which was essential of further research on the function of Septin2 in the mesangial cells.
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