一步法RT-PCR同时检测CSFV和PRRSV方法的建立及应用  

Establishment of One-step RT-PCR Method for Detection of CSFV and PRRSV and Application

作　　者：李圣[1] 郑欢莉[1] 李红炳 孔令富[1] 张晓敏[1] 钏有科 孙永科[1] 杨玉艾[1] 

机构地区：[1]云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201 [2]云南生物制药有限公司,云南昆明650225 [3]云南省保山市动物疫病预防控制中心,云南宝山678000

出　　处：《动物医学进展》2011年第6期40-44,共5页Progress In Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金(30960285);云南省自然科学基金(2100390);高层次科技人才培引工程(2009CI125-13;14)

摘　　要：猪瘟(CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害云南养猪业的传染病,为了建立一种能快速诊断猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的方法,根据NCBI上已发表的猪瘟病毒(CSFV)保守基因Erns和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守基因M基因的核苷酸序列,利用Oligo 6.0设计了2对特异性引物,经过PCR反应条件优化后,建立了CSFV和PRRSV一步法RT-PCR的检测方法。对云南部分地区猪高热病病料检测的结果表明,本方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,为云南猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的快速检测提供了重要的技术支持。Classical swine fever and porcine reproductive and respiratory syndrome are serious pig diseases in Yunnan.In order to establish a method to diagnose mixed infection with classical swine fever virus（CSFV） and porcine reproductive and nespiratory syndrome virus（PRRSV）,two pairs of specific primers were designed based on the published conservative sequences of CSFV Erns gene and PRRSV M gene in NCBI using Dligo 6.0.After optimizing conditions,the one step RT-PCR for detecting CSFV and PRRSV was established.The application in some areas of Yunnan showed that the method had good specificity,repeatability and stability.This study provided important technical support for the rapid detection of CSFV and PRRSV in Yunnan.

关 键 词：猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 一步法RT-PCR 

分 类 号：S852.651[农业科学—基础兽医学] S852.659.6[农业科学—兽医学]