牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用  

Establishment and Application of a RT-PCR Assay for Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus

作　　者：张淑琴[1] 郭利[1] 张亭亭[2] 吴永旺 武华[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院特产研究所,吉林吉林132109 [2]北京必威安泰生物科技有限公司,北京100176

出　　处：《中国畜牧兽医》2011年第6期159-162,共4页China Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：牛羊重大疫病防控技术研究与产业化(200803018)

摘　　要：根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测BVDV的RT-PCR方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,结果显示,该方法可从BVDV标准毒株Oregon C24V中扩增出471 bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒、MDBK正常细胞的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10-1TCID50/mL。应用该方法对临床腹泻病牛各脏器样品进行检测,结果比病毒分离方法更为敏感,操作简便。表明建立的RT-PCR方法具有特异、灵敏、高效、快速的特点,可用于BVDV的临床检测及流行病学监测。A reverse transcription PCR（RT-PCR） assay for detection of bovine viral diarrhea virus（BVDV）was established using a pair of specific primers of BVDV.This method could specifically amplify a 471 bp fragment from BVDV Oregon C24V strain,but not from classical swine fever virus（CSFV）,infectious bovine rhinotracheitis virus（IBRV）,bovine respiratory syncytial virus（BRSV）,parainfluenza virus-3（PI3） and normal MDBK cells.The organs were detected by RT-PCR and virus isolated that collected from a sick calf with bovine viral diarrhea（BVD） like syndrome.These results indicated that the established RT-PCR assay was specific,sensitive,efficient and rapid for detection,monitoring and epidemiological investigation of BVDV infection.

关 键 词：牛病毒性腹泻病毒 反转录聚合酶链反应 检测 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]