抗胰岛素样生长因子Ⅰ型受体单克隆抗体的制备及鉴定  

作　　者：刘世国 彭黎 龚菲 吴琼 岑千红 

机构地区：[1]湖北省中山医院检验科,湖北武汉430033

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2011年第6期647-649,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

摘　　要：目的:制备和鉴定抗胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-IR)单克隆抗体(mAb),为深入研究肿瘤细胞中IGF-IR功能及致病机制奠定基础。方法:用脂质体法将制备的重组慢病毒载体三质粒pWPXL-IGF-IR、PMD2G、PAX2共转染包装细胞293T,将上清病毒转染目的细胞NIH-3T3,通过West-ern blot检测稳转NIH-3T3细胞中IGF-IR的表达。将细胞株NIH3T3-IGF-IR免疫BALB/c小鼠,提取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0进行杂交融合,筛选出针对IGF-IR的特异性杂交瘤细胞株,Western blot鉴定单克隆细胞株的特异性。并检测其免疫球蛋白亚类及mAb效价。结果:通过细胞融合和克隆化,筛选出1株持续分泌抗IGF-IR mAb的杂交瘤细胞株9F3。该抗体能与IGF-IR特异性结合,经鉴定该抗体属于IgG1亚类。结论:成功地制备了抗IGF-IR mAb,为研究IGF-IR在肿瘤中的生物学功能奠定了基础。

关 键 词：胰岛素样生长因子I型受体 慢病毒载体 杂交瘤 单克隆抗体 

分 类 号：Q813.2[生物学—生物工程]