重组截短型ELR1蛋白在昆虫表达系统中的分泌表达与结晶  被引量:1

The expression and crystallization of out-membrane region of equine lentiviral receptor 1

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作  者:孙佩龙[1,2] 郝飞飞[2] 吕淑霞[1] 刘新奇[3] 周建华[2] 林跃智[2] 

机构地区:[1]沈阳农业大学生物科学技术学院,辽宁沈阳110161 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001 [3]南开大学生命科学学院,天津300071

出  处:《中国预防兽医学报》2011年第6期427-430,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基  金:国家自然科学青年基金(30901349);国家十一五重大传染病专项(2008ZX1001-1010)

摘  要:为获得马传染性贫血病毒单一受体(ELR1)的结晶体,本研究通过PCR方法获得ELR1胞外区基因片段,利用基因重组技术构建包含ELR1胞外区基因的重组杆状病毒表达质粒(Bacmid-ELR1)。将其转染至昆虫细胞sf9中进行蛋白表达,western blot检测结果显示ELR1胞外区截短型重组蛋白在昆虫表达系统中获得表达。目的蛋白经亲和层析和凝胶过滤方法纯后化,通过多组结晶条件筛选获得了ELR1胞外区重组蛋白结晶体。本研究为ELR1立体结构和功能的解析提供了重要基础。The receptor for equine infectious anemia virus(EIAV) was identified as equine lentiviral receptor 1(ELR1) and classified as a member of the tumor necrosis factor receptor(TNFR) family according to its sequence characteristics.Differing from human,simian and feline immunodeficiency viruses,which need co-receptors for efficient infection,EIAV completes its infection by the solo ELR1.To understand the function of ELR1 and its interaction with EIAV,prokaryotic,eukaryotic expression and crystallization of out-membrane region of this receptor was employed in this study for further structural dissection of the protein by X-diffraction and functional analysis.

关 键 词:马传染性贫血病毒单一受体 昆虫表达系统 纯化 结晶 

分 类 号:S852.65[农业科学—基础兽医学]

 

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