短C肽人胰岛素原突变体的设计与其编码基因的套叠PCR合成  

作　　者：王倩[1] 马建忠[1,2] 王永刚[1] 吴玉冰[3] 

机构地区：[1]兰州理工大学生命科学与工程学院 [2]甘肃博奥生物工程有限公司 [3]兰州大学生命科学学院

出　　处：《中国食品工业》2011年第5期81-82,共2页China Food Industry

基　　金：本研究由兰州理工大学博士启动基金、甘肃省自然科学基金B类重点、国家人事部留学归国人员择优资助项目资助.

摘　　要：基因工程人胰岛素作为第一个基因工程药物，自其使用以来解决了许多糖尿病人的疾苦。其后开展的一系列基因工程人胰岛素突变体的研究，发现了一些或长效或速效或高活性的突变体，丰富了治疗用胰岛素的类型。本文根据NCBI数据库中人胰岛素原的一级结构与三级结构模型，设计了-C肽被缩短至4个氨基酸残基（GPGA）的胰岛素突变体，期望该短连接肽在不去除的情况下维持胰岛素活性。依据大肠杆菌K12的密码子偏好性，设计了适宜大肠杆菌表达的该突变体的基因序列。利用套叠PCR方法扩增并克隆了该突变体基因。核苷酸序列测定结果表明，所克隆的突变体基因与设计的核苷酸序列存在2个碱基差异，但是氯基酸序列保持一致。

关 键 词：胰岛素原 突变体 套叠PCR 

分 类 号：Q578[生物学—生物化学]