非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链B羧基端多肽单克隆抗体的制备及鉴定  

Preparation and characterization of monoclonal antibodies against a synthetic peptide of nonmuscle myosin heavy chain Ⅱ-B C-terminal

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作  者:张璐[1] 刘宁宁[1] 吴海珍[1] 高继明[1] 肖一红[1] 周恩民[2] 

机构地区:[1]山东农业大学动物医学院,山东泰安271018 [2]西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100

出  处:《中国兽医科学》2011年第7期733-736,共4页Chinese Veterinary Science

基  金:国家行业科技计划项目(200903055);国家自然科学基金资助项目(30871857;U0931003/L01);山东省自主创新成果转化重大专项(2008ZHZX1A1101)

摘  要:为了得到能够特异性识别非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链B(NMHCⅡ-B)的单克隆抗体,根据Marc-145细胞上NMHCⅡ-B羧基端的蛋白质序列,合成多肽,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用ELISA方法筛选阳性克隆;制备腹水并纯化;用间接ELISA和间接免疫荧光试验检测纯化抗体的特异性。结果显示,获得2株能稳定传代并分泌特异性抗体的杂交瘤细胞系;单克隆抗体的特异性鉴定显示,2株细胞系所产生的抗体能够特异性地与NMHCⅡ-B羧基端蛋白反应而且能与Marc-145细胞产生特异性的结合。这2株单抗的制备及鉴定为研究易感细胞上NMHCⅡ-B与猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的关系奠定了基础。To obtain monoclonal antibodies(McAbs) against nonmuscle myosin heavy chain Ⅱ-B(NMHC Ⅱ-B),a synthetic peptide from NMHCⅡ-B C-terminal was used to immunize BALB/c mice.The hybridomas secreting specific McAbs were selected by the ELISA and indirect immunofluorescence assay.The results showed that two McAbs were produced which could react with C-terminal of NMHC Ⅱ-B and bind with Marc-145 cells.The two McAbs could be used for the study of the role of NMHC Ⅱ-B in porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection in permissive cells.

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链B羧基端 单克隆抗体 鉴定 

分 类 号:S852.659.6[农业科学—基础兽医学]

 

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