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机构地区:[1]河北北方学院农林科技学院,张家口075131 [2]天津大学农业与生物工程学院,天津300072 [3]吉林大学植物科学学院,长春130062
出 处:《植物遗传资源学报》2011年第4期605-611,共7页Journal of Plant Genetic Resources
基 金:国家植物转基因技术研究开发与中试基地建设专项(J99-B-001);国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08003-019B;2008ZX08003-005;2008ZX08004-001)
摘 要:以3个水稻品种成熟胚诱导的良好胚性愈伤组织为受体,以LycB为目的基因,应用根癌农杆菌介导法对水稻进行遗传转化,同时以抗性愈伤率为依据,对影响转化的几个因素进行优化研究。结果表明,预培养4d、侵染5-10min、农杆菌菌液浓度OD600值0.7-1.0、共培养2d有利于提高转化率。经潮霉素筛选获得的抗性植株经PCR和PCR-Southern分析鉴定,初步证明外源基因LycB已整合到水稻的基因组中。Callus induced from mature embryos of 3 rice varieties were transformed by Agrobactorium tumefaciens.Transformation efficiency was affected by factors of pre-culture time,density of bacteria,duration for inoculation and co-cultivation.The transformation conditions were optimized with the combination of pre-culture of 4 days,infection in bacterium with OD600 0.7—1.0 for 5—10 minutes,followed by co-culture of 2 days.Plantlets with resistance to hygromycin were regenerated.PCR and PCR-Southern analysis on them confirmed the integration of the LycB be into the rice genome.
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