线粒体外膜转位因子Tom40在大肠杆菌中的表达和重新折叠的研究  

Expression in E.coli and Refolding of the Rat Translocase of Mitochondrial Outer Membrane Tom40

作　　者：纪志娜[1] 梁艳俊[1,2] 李唐宁[1] 徐筠[1] 李树杰[1] 

机构地区：[1]南开大学生物物理系,天津300071 [2]南开大学医院,天津300071

出　　处：《南开大学学报（自然科学版）》2011年第3期98-103,共6页Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Nankaiensis

基　　金：国家自然科学基金(30840028;30970579);天津基础科学和高新技术研究项目(08JCYBJC25800);教育部博士点基金(200800551035)

摘　　要：位于线粒体外膜上的TOM转运复合体负责转运在胞质中合成的蛋白进入线粒体,而Tom40蛋白是TOM转运复合体的核心组分,它构成该复合体的蛋白质转运孔道.尽管多年来对TOM复合体及其亚基转运蛋白的功能进行了大量的研究,然而由于核心亚基Tom40的三维空间结构尚未解析出来,其转运蛋白的机理还不清楚.尝试用大肠杆菌大量表达大鼠Tom40蛋白,并对其包涵体进行了纯化和重新折叠的研究.圆二色谱(CD)和高灵敏度微热量分析(VP-DSC)结果表明重新折叠的蛋白具有紧凑的二级和三级结构.该实验结果为Tom40的结晶化和三维空间结构解析奠定了重要的物质基础.The translocases of the mitochondrial outer membrane（TOM）transport the proteins synthesized in cytoplasm into mitochondria.Tom40 is an essential component of TOM complex,which forms a pore of TOM complex.Though many studies on TOM complex have been reported,the mechanism of the transportation remains unclear yet.Here,we expressed rat Tom40 in E.coli as a including body and purified the protein,and studied the refolding of the including body.The results of CD and VP-DSC of the refolded Tom40 protein revealed that the refolded protein has compact secondary and tertiary structure.This study is important basis for further crystallization of the Tom40.

关 键 词：线粒体 TOM复合体 Tom40 重新折叠 

分 类 号：Q73[生物学—分子生物学]