块根紫金牛ISSR-PCR反应体系的建立与优化  

Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Ardisia pseudocrispa

作　　者：陈宗游[1] 史艳财[1] 罗宝丽[2] 邹蓉[1] 孔德鑫[1] 韦霄[1] 

机构地区：[1]广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林541006 [2]广西师范大学生命科学院,广西桂林541004

出　　处：《种子》2011年第7期82-85,共4页Seed

基　　金：广西科技攻关项目(桂科攻0992003B-37);广西植物研究所基本业务费合同(桂植业10001);广西科技创新能力建设项目(桂科能0992028-10)

摘　　要：采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立块根紫金牛ISSR-PCR反应体系和扩增程序,即25 ul的体系中含Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 0.15mmol/L,引物1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0 U,模板DNA 50ng,10×Buffer 2.5μl。适宜的扩增程序是94℃预变性5 min,94℃变性30 s,56.6℃退火45 s,70℃延伸2.0 min;45个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。采用正交和单因素试验可快速建立ISSR-PCR反应体系。该体系稳定、可靠,可用于块根紫金牛遗传多样性分析。

关 键 词：块根紫金牛 ISSR-PCR 正交设计 单因素试验 

分 类 号：R282.7[医药卫生—中药学]