甜叶菊RAPD反应体系的优化  

Optimization of'RAPD Reaction System in Stevia rebaudiana Bertoni

作　　者：胡能兵[1,2] 何克勤[1,2] 张子学[1,2] 林平[1,2] 隋益虎[1,2] 崔广荣[1,2] 

机构地区：[1]安徽科技学院植物科学学院,安徽凤阳233100 [2]安徽省甜叶菊工程技术研究中心,安徽蚌埠233000

出　　处：《激光生物学报》2011年第4期560-563,477,共5页Acta Laser Biology Sinica

基　　金：安徽省教育厅省级重点自然科学基金项目(KJ2010A073);蚌埠市科技计划项目(科字051)

摘　　要：以甜叶菊为试材,对影响其RAPD反应体系的7个因子进行优化。结果表明,20μL的优化体系包括:双蒸水13.6μL,10×Buffer(含15 mmol/L MgCl_2)溶液3μL,2.5 mmol/L的dNTPS 1.2μL,10μmol/L的引物1μL,20 ng的模板DNA 1μL,1 U Taq聚合酶;热循环程序为:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,35℃退火30 s,72℃C延伸1 min,40个循环,最后72℃延伸7 min。Optimization of 7 factors of RAPD reaction system in Stevia rebaudiana Bertoni was studied. The results in- dicated that, optimization system of 20 ~xL included：l 3.6 /μL of ddH20, 3 μL of 10 x Buffer with 15 mmol/L MgC12, 1.2 μL of 2.5 mmol/L dNTPS, 1 μL of 10 p^mol/L Primer, 1 μL of 20 ng DNA and 1 unit ofTaq polymerase; thermal cycle program was ： 1 cycle of denaturing for 4 min at 94 °C, 40 cycles of denaturing for 30 s at 94 °C, annealing for 30 s at 35 °C, primer extension for 1 min at 72°C, and the last cycle of extension for 7 min at 72 °C.

关 键 词：甜叶菊 RAPD 优化 

分 类 号：Q943[生物学—植物学]