野生濒危植物掌叶木的ISSR-PCR反应体系的建立  

Optimization of ISSR-PCR Amplification in Handeliodendron bodinieri(Lévl.)Rehd.

作　　者：李雪萍[1] 李在留[2] 崔彬彬[3] 贺春玲[1] 彭健[2] 杨婷[2] 周振艳[2] 

机构地区：[1]河南科技大学林学院,洛阳471003 [2]广西大学林学院,南宁530004 [3]保定学院生化系,保定071000

出　　处：《生物技术通报》2011年第9期167-170,共4页Biotechnology Bulletin

基　　金：国家自然科学基金项目(31060053);河南省自然科学基金项目(62580021);广西自然科学基金项目(2011GXNSFB018016)

摘　　要：以野生濒危植物掌叶木的叶片为材料,通过单因子试验分别研究了模板DNA、退火温度、Taq DNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg2+浓度、引物浓度等对ISSR-PCR反应的影响,找出各自的合适条件,通过各个因子的组合研究建立了适宜于掌叶木ISSR分析的扩增体系,即25μL的反应体系中含模板DNA约30 ng,Mg2+2.0 mmol/L,引物0.8μmol/L,dNTP0.20 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U。该研究为利用ISSR分析掌叶木遗传多样性、进行掌叶木种质资源研究等奠定了良好的基础。In order to establish an optimal reaction system of ISSR-PCR in Handeliodendron bodinieri（Lévl.）Rehd.,the effects of main elements,such as template DNA concentration,annealing temperature,Taq DNA polymerase dosage,dNTP concentration,Mg2＋concentration,primer concentration,were tested by single factor experiments respectively.The optimal reaction system for ISSR analysis in Handeliodendron bodinieri（Lévl.）Rehd.included 30 ng template DNA,1×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl2,0.20 mmol/L each of dATP,dCTP,dGTP and dTTP,1.5 unit of Taq DNA polymerase and 0.8 μmol/L primer in a total volume of 25 μL.The research would laid a satisfactory foundation for ISSR analysis in Handeliodendron bodinieri（Lévl.）Rehd.

关 键 词：掌叶木 ISSR PCR 优化 

分 类 号：Q943[生物学—植物学]