表达蝎毒素的重组斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltMNPV)的构建及毒力  

Construction and toxicity the recombinant SpltMNPV expressing the scorpion toxin gene

作　　者：汤欣欣[1] 孙兴鲁[2] 浦冠勤[2] 王文兵[3] 张传溪[4] 秦启联[5] 朱江[1] 

机构地区：[1]苏州大学医学部基础医学与生物科学研究院,苏州215123 [2]苏州大学金螳螂建筑与城市环境学院,苏州215123 [3]江苏大学生命科学研究院,镇江212013 [4]浙江大学昆虫科学研究所,杭州310058 [5]中国科学院动物研究所,北京100101

出　　处：《微生物学报》2011年第11期1502-1509,共8页Acta Microbiologica Sinica

基　　金：国家自然科学基金项目(31070136);苏州市科技支撑计划项目(SNG0924)~~

摘　　要：【目的】开发高毒力的重组斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedroviruse,SpltMNPV)杀虫剂。【方法】构建编码蜕皮激素UDP-葡萄糖基转移酶(ecdysterioid UDP-glucosyl transferase gene,egt)基因缺失并插入东亚钳蝎神经毒素(B.martensi Karsch,BmK ITa1)基因的重组转移载体,重组转移载体与SpltMNPVⅡ基因组DNA共转染斜纹夜蛾细胞,通过荧光斑法与有限稀释法相结合筛选重组病毒。【结果】成功筛选出缺失egt基因的、早期启动子(ie-1)启动的、表达BmK ITa1成熟肽的重组病毒SpltMNPV-Δegt-Pph-egfp-ie-1-BmK ITa1。生物测定结果显示,重组病毒的杀虫速度(LT50)较野生病毒提前0.7-0.8 d。【结论】通过在SpltMNPV病毒基因组中插入外源毒素基因可明显增强病毒的杀虫效果,结果说明开发高毒力SpltMNPV生物杀虫剂具有可行性。[Objective] To develop a high toxic recombinant Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedroviruse（SpltMNPV） insecticide.[Methods] We constructed a recombinant transfer vector that was characterized by disrupting of ecdysterioid UDP-glucosyltransferase（egt） gene and expressing the mature peptide of the Chinese scorpion,B.martensi Karsch（BmK ITa1） gene at the control of ie-1 promoter.The transfer vector and the SpltMNPV II DNA co-transfected the SpLi cells.Recombinant viruses were purified by the end point dilution and fluorescent spot purification.[Results] We successfully screened the recombinant SpltMNPV-Δegt-Pph-egfp-ie-1-BmK ITa1 of which the egt gene was knocked out and expressed the mature peptide of the BmK ITa1 gene at the control of ie-1 promoter.Bioassays showed that,compared to the wide-type SpltMNPV,the speed of the recombinant virus killing the S.litura（LT50） increased by 0.7-0.8 days.[Conclusion] The insecticidal effect of SpltNPV could be increased by inserting the foreign gene,which provided a further opportunity to develop the SpltNPV into commercially viable products to control the S.litura.

关 键 词：斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedroviruse SpltMNPV) 东亚钳蝎神经毒素基因(B.martensi Karsch BmK ITa1) 蜕皮激素UDP-葡萄糖基转移酶基因(ecdysterioid UDP-glucosyl transferase gene egt) 重组杆状病毒 

分 类 号：S476[农业科学—农业昆虫与害虫防治]