pQE32-FOXP4ORF质粒的构建及其表达的研究  

The Construction and Expression of Combinant pQE32-FOXP4 ORF

作　　者：成迎端[1] 袁婺洲[1] 

机构地区：[1]湖南师范大学生命科学学院,中国湖南长沙410081

出　　处：《生命科学研究》2006年第S2期51-54,共4页Life Science Research

基　　金：国家自然科学基金资助项目(305709343027064430213904);湖南省自然科学基金资助项目(02JJY40260355Y4011);教育部与湖南省教育厅基金资助项目(02A02802B01703C208)

摘　　要：利用已建立的GenBank数据库提供的已知序列,初步克隆了一个新的人类基因,经国际基因命名委员会批准命名为FOXP4(forkheadboxP4).FOXP4的开放阅读框ORF长4186bp,包含有17个外显子,可以编码一个667个氨基酸的多肽链,蛋白质相对分子质量大小为73.4kDa.为了研究FOXP4基因编码产物在细胞内的作用,构建表达型质粒(pQE32)与FOXP4基因的穿梭表达载体pQE32-FOXP4ORF.利用异丙基硫代-βD-半乳糖苷(isopropyl-βD-t-hiogalactoside,IPTG)对蛋白质的表达进行诱导,在适合的温度和浓度下,经过一定的时间,使细胞大量表达外源蛋白.用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测,得出诱导的最佳的浓度和温度,再进行大量诱导,通过电泳分离,将外源蛋白提取出来,从而对基因的功能进行进一步的研究.Taking full advantage of the known sequences from GenBank database,we cloned a novel human gene FOXP4(forkhead box P4)which had been approved by HUGO Gene Nomenclature Committee.The open reading frame(ORF) of this new gene is 4 186 bp long and contains 17 exons which encodes a 73.4 kDa protein of 667 amino acids.In order to analyze the expression of FOXP4,we constructed the expression plasmid combinant of pQE32-FOXP4ORF and chose a number of different temperature and concentration of IPTG(isopropyl-β-D-thiogalactoside) to induce it′s expression,then the protein was detected by SDS-PAGE after electrophoresis.

关 键 词：FOXP4 表达型质粒 蛋白表达 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]