中华按蚊击倒抗性突变PCR检测方法的建立  

Establishent of AS-PCR method for detecting the knockdown resistance of Anopheles sinensis

作　　者：武松[1] 马尔健[2] 刘茜[1] 陆群[2] 仰凤桃[2] 洪结凤[1] 叶苗青[1] 俞俊峰[1] 

机构地区：[1]安徽中医学院中西医结合临床学院,合肥230038 [2]合肥市疾病预防控制中心,合肥230061

出　　处：《中国人兽共患病学报》2011年第11期1008-1010,共3页Chinese Journal of Zoonoses

基　　金：安徽省自然科学基金(No.10040606Q38);安徽省优秀青年教师基金项目(No.2009SQRZ119);合疾控科研(No.2011-3);第五轮中国全球基金疟疾项目实施性研究专项基金(No.GF/M5/2010-04)联合资助

摘　　要：目的建立可靠的中华按蚊拟除虫菊酯击倒抗性的PCR检测方法。方法基于课题组前期研究发现的拟除虫菊酯抗性中华按蚊钠离子通道蛋白(VGSC)L1014位点的突变机制,即TTG突变为TTT和TGT,设计特异AS-PCR引物,进行中华按蚊拟除虫菊酯杀虫剂抗性突变检测。结果设计的AS-PCR引物和建立的反应体系可以分别扩增出现已发现的中华按蚊击倒抗性的TTG(T)杂合、TTT纯合、TG(T)G(T)杂合、TG(T)T杂合,PCR电泳图结果与测序图结果一致。结论成功建立中华按蚊击倒抗性突变的PCR检测方法,可用于现场中华按蚊的击倒抗性检测。The objectie of the present research was to establish the PCR method for An.sinensis knockdown resistance detection.Based on the mutation mechanism of An.sinensis VGSC gene L1014 position,AS-PCR primers were designed to amplify the Kdr mutation and TTG（T） heterozygote,TTT homozygote,TG（T）G（T） heterozygote,TG（T）T heterozygote were successfully amplified and the PCR result was same to the result of gene sequencing.The AS-PCR method for An.sinensis knockdown resistance mutation detection was successfully established and could be used for field study ofAn.sinensis DDT and pyrethoids resistance detection.

关 键 词：中华按蚊 拟除虫菊酯 击倒抗性 PCR 检测 

分 类 号：R384[医药卫生—医学寄生虫学]