基因诱变、重组、克隆  

出　　处：《生物技术通报》1993年第7期29-32,共4页Biotechnology Bulletin

摘　　要：932201用于酿酒酵母的多位点整合盒区[英]/Kudla,B.…//Gene.-1992,119(1).-49～56[译自 DBA,1993,12(2),93-00640]在该酵母基因组多个位点整合克隆的DNA所用的载体质粒为 pBK614。该载体含一个∑-序列,它在酵母基因组中有20～30个拷贝。载体的盒区含有嵌插着一个多克隆位点的341bp 的全长信号构件,从而可导入任何克隆的:DNA 片段。构件旁有限制性酶切点,可分离到不含外部序列的∑-嵌插的盒区。这些特点使具有∑-末端的 DNA 得以纯化。能很有效地对准酵母原有的∑-序列。由于成功的整合并未消除定靶性能,所以,靶序列的天然重复允许在一系列转化中对同一载体使用几次。有一定拷贝数的基因整合可用于蛋白的超量表达。

关 键 词：酵母基因组 多克隆位点 拷贝数 酿酒酵母 基因整合 限制性酶切 基因调节 嵌插 超量表达 多位点 

分 类 号：Q81[生物学—生物工程]