吴茱萸ISSR-PCR反应体系优化  

Optimization for ISSR-PCR Reaction System in Evodia rutaecarpa

作　　者：吴波[1,2] 高丹[3] 潘超美[1] 张寿文[3] 

机构地区：[1]广州中医药大学中药学院,广东广州510006 [2]江西中医学院江西省中药种质资源工程技术研究中心,江西南昌330004 [3]江西中医学院药学院,江西南昌330004

出　　处：《安徽农业科学》2011年第32期19686-19688,共3页Journal of Anhui Agricultural Sciences

基　　金：国家"十二五"科技支撑计划项目(2011BAI04B04)

摘　　要：[目的]建立吴茱萸ISSR-PCR最佳反应体系。[方法]采用改良的CTAB法提取吴茱萸基因组DNA,研究模板DNA、dNTPs、Mg2+、引物(U834)、Taq DNA聚合酶的浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响。[结果]20μl反应体系中含2μl 10×PCR buffer,0.15 mmol/LdNTPs,1.6 mmol/L Mg2+,0.4 mmol/L引物,20 ng模板DNA,1.2 U Taq DNA聚合酶。[结论]为研究吴茱萸种质资源遗传多样性和分子鉴定奠定了技术基础。[Objective]The optimal ISSR-PCR reaction conditions for Evodia rutaecarpa were determined.[Method]The genomic DNA of Evodia rutaecarpa was extracted with improved CTAB method.The effects of concentration of template DNA,dNTPs,Mg^2＋,primer（U834） and Taq DNA polymerase were studied.[Result]The optimum ISSR-PCR reaction system with total 20 μl reaction solution contained 2 μl 10×PCR buffer,0.15 mmol/L dNTPs,1.6 mmol/L Mg^2＋,0.4 mmol/L primer,20 ng template DNA and 1.2 U Taq DNA polymerase.[Conclusion]The study laid the foundation for genetic diversity and molecular identification of germplasm resource in Evodia rutaecarpa.

关 键 词：吴茱萸 ISSR 反应体系 优化 

分 类 号：S188[农业科学—农业基础科学]