应用低能N~＋介导法将大豆外源基因转入羊柴成熟种子的初步研究  

Trasfering Soybean Gene into Hedysarum mongolicum Mature Seeds by Low Energy N^+ Implantation

作　　者：陈玲玲[1] 那日[2] 乌艳红[1] 栾守泉[1] 正月 

机构地区：[1]赤峰市农牧科学研究院,内蒙古赤峰024031 [2]内蒙古大学物理科学与技术学院/内蒙古大学离子束生物工程自治区重点实验室,内蒙古呼和浩特010021

出　　处：《草地学报》2011年第6期1036-1041,共6页Acta Agrestia Sinica

基　　金：国家自然科学基金(50267001);内蒙古自治区自然科学基金重大项目(200711020101);内蒙古教育厅基金项目(NJ05025)资助

摘　　要：为研究低能N+介导大豆(Glycine max)基因遗传转化的影响,以羊柴(Hedysarum mongolicum)成熟种子为材料,根据不同注入剂量下羊柴种子的发芽率,计算出羊柴种子发芽率的差异性并绘制出剂量-存活率曲线,找出最适宜的转化剂量。结果表明:经离子束(25keV,900×2.6×1013 N+.cm-2)注入后的羊柴成熟种子发芽率的差异性和剂量-存活率曲线可以确定900×2.6×1013 N+.cm-2是最适宜的转化剂量。将处理后的羊柴种子浸入含有大豆质粒DNA的SSC导入介质,24h后观察到受离子束直接作用的胚部有外源基因的导入和表达,检测到的GUS基因瞬间表达率为13%,转化体的PCR检测结果初步证实了大豆基因已经整合到羊柴基因组中。Effects of low energy N＋ implantation on Hedysarum mongolicum mature seeds are studied.The germination rates and survival rates of Hedysarum mongolicum dry seeds with different N＋ implantation dosages are investigated.Results show that the feasible transformation dosages are 900×2.6×1013 N＋·cm-2.The blue cells expressing β-glucuronidase are observed at Hedysarum mongolicum callus with 13% transient expression.PCR analysis of transformed plants shows that the soybean gene had been integrated into Hedysarum mongolicum genome.

关 键 词：离子束 羊柴 成熟种子 遗传转化 

分 类 号：Q785[生物学—分子生物学]