外源合成dsRNA介导大豆疫霉PsCdc14基因沉默后对孢子囊发育的影响  

作　　者：赵伟[1] 杨新宇[1] 董莎萌[1] 盛玉婷[1] 王源超[1] 郑小波[1] 

机构地区：[1]南京农业大学植物保护学院,教育部作物病虫害防控重点实验室,南京210095

出　　处：《中国科学：生命科学》2011年第12期1177-1184,共8页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：农业部行业专项基金(批准号:3-20);江苏省高校重点学科建设基金资助项目

摘　　要：真核生物中,蛋白磷酸酶Cdc14在细胞有丝分裂过程中发挥着重要的调控作用.已有研究表明,在导致马铃薯晚疫病的致病疫霉病原菌中,Cdc14对游动孢子囊的形成过程起关键性的调控作用.但其在导致大豆根腐病的大豆疫霉病原菌中的作用机制还不清楚.实时定量PCR分析大豆疫霉PsCdc14在不同的生活史和侵染阶段的转录水平发现,PsCdc14在游动孢子囊形成、游动孢子和休止孢3个阶段具有较高的转录水平,但是在菌丝和侵染阶段转录水平很低.由此推测,PsCdc14在疫霉无性繁殖阶段发挥着重要的调控作用,进而影响病害的传播及蔓延.双链RNA(dsRNA)介导的转录后目的基因沉默是真核生物十分保守的一种调控机制.将体外合成dsRNA和聚乙二醇(PEG)介导的大豆疫霉原生质体转化技术相结合,建立了大豆疫霉dsRNA介导的瞬时基因沉默体系,并利用此体系对大豆疫霉中PsCdc14基因进行了功能分析.结果表明,体外合成的PsCdc14dsRNA转入大豆疫霉原生质体后,能够导致内源的基因转录水平显著下降,沉默转化子的游动孢子囊产量显著降低.本研究表明,利用dsRNA介导的瞬时基因沉默能够更加方便、快捷地分析大豆疫霉的基因功能,加深人们对大豆疫霉生长发育和致病机制的理解.

关 键 词：大豆疫霉 PsCdc14 游动孢子囊 瞬时转化 

分 类 号：S435.651[农业科学—农业昆虫与害虫防治]