犹他游动放线菌中酰胺水解酶基因拷贝数增加对转化棘白菌素B效率的影响  

Influence of amidohydrolase gene copy number increasing in Actinoplanes utahensis strain on echinocandin B bioconversion efficiency

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作  者:刘爱娟[1] 常青[1,2] 李继安[1] 卢亮[1] 陈代杰[1] 苏敏[1,3] 邵雷[1] 

机构地区:[1]上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海200437 [2]华东师范大学生命科学学院,上海200062 [3]华东理工大学生物工程学院,上海200237

出  处:《中国新药杂志》2012年第1期17-20,47,共5页Chinese Journal of New Drugs

基  金:国家"重大新药创制"科技重大专项(2009ZX09301-007);国家自然科学基金青年科学基金项目(30801449);国家自然科学基金(81172962);上海市青年科技启明星计划(B类)(11QB1406300)

摘  要:目的:利用ΦC31整合酶介导的位点特异性重组方法,构建棘白菌素B酰胺水解酶基因拷贝数增加的犹他游动放线菌重组菌株。方法:构建含有棘白菌素B酰胺水解酶基因的基因整合型质粒pYGCQ-03-13,通过属间接合转移的方法将该基因片段转入犹他游动放线菌SIPI-T2001中;利用静息细胞转化法,考察其对转化效率的影响。结果:筛选得到的阳性重组菌株SIPI-GE.T2001,对棘白菌素B的转化效率最高达到61.7%。结论:增加棘白菌素B酰胺水解酶基因拷贝数,有效地提高了犹他游动放线菌对棘白菌素B的转化效率。Objective: To construct genetic engineering strain containing more copies of echinocandin B deacylase by ФC31-directed site-specific recombination. Methods:The gene integrated plasmid pYGCQ-03-13 containing echinocandin B deaeylase gene was constructed and transformed into Actinoplanes utahensis strain SIPI- T2001 with conjugation. The bioconversion efficiency of the recombination strain was studied with method of resting cells conversion. Results:A recombinant strain named SIPI-GE. T2001 was screened and its bioeonversion efficiency was increased to 61.7%. Conclusion: Increasing the copies of echinocandin B deacylase gene in Actinoplanes utahensis can improve the bioconversion efficiency for echinocandin B.

关 键 词:棘白菌素 酰胺水解酶 犹他游动放线菌 生物转化 基因重组 

分 类 号:R915.1[医药卫生—微生物与生化药学]

 

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