利用改进的cDNA RDA技术分离胡萝卜(Daucus carota L.)体细胞胚根发育相关的基因  

作　　者：刁丰秋[1] 张雷[1] 黄美娟[2] 吴乃虎[1] 

机构地区：[1]中国科学院发育生物学研究所,北京100080 [2]北京大学生命科学学院,北京100871

出　　处：《中国科学（C辑）》2000年第1期36-43,共8页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金资助项目!(批准号 :396 30 0 40 )

摘　　要：根据链霉亲和素与生物素之间的结合作用及磁性吸附分离的原理 ,发展出改进的cDNA代表性差式分析 (representationaldifferenceanalysis ,RDA)技术 ,并用来检测在调控和解调控培养 1 2h的胡萝卜体细胞胚中特异表达的基因 .结果显示 ,在解调控 1 2h的胡萝卜体细胞胚中 ,存在 4条特异表达的cDNA片段 ,命名为NR_1 ,NR_2 ,NR_3和NR_4.将这些片段分别克隆在pBS噬菌粒载体中 .DNA序列同源性比较表明 ,片段NR_3和NR_4分别与植物的DnaJ和木质葡聚糖内转糖基化酶 (xyloglucanendo_transglycosylase)的编码基因有很高的同源性 ,而片段NR_2中有一段序列与LEA蛋白 (lateembryogenesisabundantproteins)基因有一定的同源性 .NR_1则可能来自新基因 .用3 2 P标记NR_1作探针 ,与cDNA片段群体进行杂交证实 ,从解调控 1 2h的胡萝卜体细胞胚中克隆到一种与胚根发育相关的新基因序列 .Southern杂交表明 。

关 键 词：胡萝卜 CDNA RDA 体细胞胚 胚根发育 基因克隆 

分 类 号：Q943.2[生物学—植物学]