假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位研究  

作　　者：李忠玉[1] 黄秋林[2] 粟盛梅[1] 周洲[1] 陈超群[1] 钟光明 吴移谋[1] 

机构地区：[1]南华大学微生物学与免疫学教研室,衡阳421001 [2]南华大学附属第一医院,衡阳421001 [3]University of Texas Health Science Center at San Antonio,TX 78229,USA

出　　处：《中国科学：生命科学》2012年第1期64-70,共7页Scientia Sinica(Vitae)

基　　金：国家自然科学基金(批准号:30970165,81102230);湖南省自然科学基金(批准号:09JJ3059);湖南省高校科技创新团队(批准号:湘教通[2010]212号)项目资助

摘　　要：包涵体膜蛋白在沙眼衣原体致病过程中发挥重要的作用.为确定假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位及特征,本研究采用PCR方法从D型沙眼衣原体的基因组中扩增Ct440基因,克隆入pGEX-6p原核表达载体构建pGEX-6p/Ct440原核表达重组体,重组体转化到XL1-blue大肠杆菌,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT440.纯化后的CT440融合蛋白免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光(IFA)和Western blot测定抗体的特异性.特异性抗体用于分析CT440蛋白在衣原体感染细胞内的定位、表达时相特征及其对衣原体感染的影响.结果表明,CT440蛋白定位于沙眼衣原体包涵体膜上,为沙眼衣原体包涵体膜蛋白;该蛋白在衣原体感染12h后开始表达,直至持续到整个感染周期;转基因在胞浆表达的CT440融合蛋白不影响其后的衣原体感染.本实验为深入研究衣原体与宿主细胞间的相互作用,阐明衣原体致病机制提供了重要的实验依据.

关 键 词：沙眼衣原体 CT440 包涵体膜蛋白 

分 类 号：R759[医药卫生—皮肤病学与性病学]