不同体细胞类型和基因转染方式对绵羊克隆胚胎体外发育的影响  

作　　者：崔茂盛[1] 冯冲[2] 张金龙[1] 张效生[1] 李义海[1] 冯建忠[1] 

机构地区：[1]天津市畜牧兽医研究所,天津300112 [2]中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094

出　　处：《畜牧与兽医》2012年第1期57-60,共4页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：天津市农业科学院院长基金(09013);转基因生物新品种培育重大专项(2009zx08010-020B)

摘　　要：首先获得绵羊胎儿成纤维细胞、成年耳组织成纤维细胞及前脂肪细胞,用脂质体介导法、BTX电转法及Nucleofector核转法对上述细胞系转染绿色荧光蛋白(gfp)基因,并对转染效率进行比较,最后探讨3种转gfp基因细胞对绵羊转基克隆胚发育的影响。结果:核转法的转基因效率最高,3种细胞的转基因效率分别为86%,87%和90%,显著高于BTX电转法和脂质体法基因转染效率;脂质体转染效率显著低于BTX电转效率(P<0.05)。而对同一种转染方法而言,基因转染效率在3种细胞间差异均不显著(P>0.05)。在以上述3种转基因细胞为核供体的转基因克隆试验中,胚胎融合率、卵裂率均无显著性差异(P>0.05),胎儿成纤维细胞组的囊胚率显著高于前脂肪细胞组(P<0.05),但耳组织成纤维细胞组与胎儿成纤维细胞、前脂肪细胞间差异均不显著(P>0.05)。结果表明核转法基因转染效率最高,胎儿成纤维细胞最适合于胚胎克隆研究。

关 键 词：绵羊 体细胞 基因转染 克隆 

分 类 号：S826.8[农业科学—畜牧学]