小鼠早期胚胎的全胚原位杂交技术  

Whole-mount in situ hybridization for analysis of gene expression in mouse embryos of early developmental-stage embryos

作　　者：肖銮娟[1] 谢琪璇[1,2,3,4] 高桥祐司 秋山泰身[6] 董少男[1] 黄卉卉[1] 罗峰[1] 叶绍恩[1] 张春雪[1] 秦俊文[1,2,3,4] 

机构地区：[1]暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所,广东广州510632 [2]暨南大学再生医学教育部重点实验室,广东广州510632 [3]暨南大学再生医学香港中文大学-暨南大学联合实验室,广东广州510632 [4]暨南大学科技部及广东省科技厅国际科技合作基地,广东广州510632 [5]国立成育医疗研究中心生殖·细胞医疗研究部,东京157-8535 [6]东京大学医科学研究所分子发癌分野,东京108-8639

出　　处：《暨南大学学报（自然科学与医学版）》2011年第6期620-623,共4页Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition)

基　　金：广东省自然科学基金项目(9451063201002016);教育部留学回国人员科研启动基金项目(23610022);暨南大学引进人才科研启动基金项目(51209004);中央高校基本科研业务费专项资金项目(21610406)

摘　　要：目的:探索一种适合于早期胚胎基因表达型检测的全胚原位杂交技术。方法:收集小鼠囊胚、固定;制备VASP、IL1R2基因特异性地高辛标记的cRNA探针;对囊胚进行杂交前处理、全胚原位杂交、抗体处理、显色以及显色后处理与镜检。结果:VASP、IL1R2特异性表达在囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞中。结论:小鼠早期胚胎全胚原位杂交技术适用于早期胚胎基因时空表达型的检测。Aim： To establish a powerful technique as a whole-mount in situ hybridization for determi-nation of the temporal and spatial gene expression patterns in early developmental-stage embryos. Meth-otis： Murine blastocysts were collected and fixed. Whole-mount in situ hybridization was performed as：preparation of VASP and IL1R2 gene specific digoxigenin-labeled cRNA probe, pre-treatment and whole-mount in situ hybridization of the blastocysts, visualization of the labeled cRNA and treatment after visual-ization, microscope analysis. Results： Expression of VASP and ILIR2 was detected in both inner cell massand trophoblast of blastocysts. Conclusion：The present protocol described here is suitable for detection ofthe gene expression patterns in early developmental-stage embryos.

关 键 词：小鼠 早期胚胎 全胚原位杂交 血管扩张刺激磷蛋白(VASP) 白细胞介素1受体2(IL1R2) 

分 类 号：Q33[生物学—遗传学]