钠离子调节成骨细胞功能及其相关基因的差异性变化  

Regulation of sodium on osteoblast and osteogenesis genes

作　　者：卢丽[1] 林晓慧[1] 陈珺[1] 陆幸妍[1] 吴亮[1] 贾欢欢[1] 万超[2] 李青南[1] 

机构地区：[1]广东药学院生命科学与生物制药学院新药功能研究中心,广州510006 [2]香港中文大学医学院生物医学学院干细胞与再生医学中心

出　　处：《广东医学》2012年第3期299-302,共4页Guangdong Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金面上项目(编号:30971172);广东省科技计划项目(编号:2010B050700022)

摘　　要：目的探讨钠离子(Na+)对大鼠成骨细胞成骨功能的调节,及其相关基因mRNA的变化。方法应用CCK-8试剂盒和碱性磷酸酶(AKP)试剂盒检测5种不同浓度Na+对成骨细胞增殖和分化的影响。再从中选用低(1×10-4mol/L)、中(0.1 mol/L)、高(0.5 mol/L)3种浓度,于处理细胞15、30、120 min时,通过RT-PCR测定Na+对成骨细胞成骨功能相关基因OPN、Cbfa1 mRNA转录的影响。结果在1×10-4～1 mol/L范围内,与正常组相比,低浓度Na+明显促进成骨细胞分化,使AKP活性增加,高浓度则呈抑制作用,而Na+对成骨细胞的正常增殖无影响。RT-PCR结果显示与正常组相比,低浓度Na+显著地上调成骨细胞OPN、Cbfa1 mRNA的转录,高浓度则呈抑制作用。然而OPN、Cbfa1基因对Na+调节作出反应所需的时间存在差异,Cbfa1基因在经处理30 min时即可出现mRNA转录变化,而OPN基因则在处理120 min时才出现相应改变。结论 Na+可直接调节成骨细胞成骨功能,低浓度促进成骨细胞分化和相关功能基因OPN、Cbfa1的增加,而高浓度则显示抑制作用;且各基因转录变化具有时间差异。Objective To study the regulative effects of sodium on the rat osteoblast and the osteogenesis gene transcription. Methods Osteoblasts were isolated from neonatal SD rat skull. Cell proliferation and differentiation were evaluated by CCK - 8 assay kit and AKP assay kit, respectively. The transcription of cbfal （ Core - binding factor al）, OPN （Osteopontin） were assessed by RT- PCR 15,30,120 min after treated by different concentrate sodium medium （1 × 10-4mol/L, 0. 1 mol/L and 0. 5 mol/L）. Results Low concentration sodium （ 1 ×10-4moL/L） significantly promoted the osteoblast alkaline phosphatase （AKP） activity, and osteogenesis genes （OPN and Cbfal ） transcription at 2 h. However, significant opposite effects were revealed in high concentration sodium （0. 5 mol/L） on osteoblast. Observed re- sponse of Cbfal mRNA was revealed 30 min after treatment, while OPN was delayed until 120 min after treatment. Conclusion Sodium can regulate bone formation in osteoblast, low sodium concentration promote osteoblast differentiation and osteoblastic gene （ OPN and Cbfal ） transcription, while high sodium concentration inhibits these progresses. The time required for response of sodium treatment is various in different osteogenesis gene.

关 键 词：钠离子 成骨细胞 碱性磷酸酶 OPN CBFA1 

分 类 号：R587.1[医药卫生—内分泌]